人生就是博的实验原理是通过脂类染料（例如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染。随后，将预染的血清放置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。施加电流后，脂蛋白向正极移动，并被分离为多个区带。

试剂与器材：

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：包含巴比/妥钠154g，巴比/妥276g，EDTA酸0.292g，溶解后加水至1000ml。

2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：包含三甲基氨基甲烷12.12g，EDTA酸0.29g，NaCl15.85g，溶解后加水至1000ml。

3. 琼脂糖凝胶：琼脂糖0.45g，三羟甲基氨基甲烷缓冲液50ml，水50ml，在加热至沸腾后立即停止加热，确保琼脂糖完全溶解。

4. 挖槽工具：制作切口刀，刀口长度为15mm，中央夹有机玻璃或木片，用螺丝固定，使两刀片相距15mm；挖槽小匙：约6cm长的直径为15mm的铜丝，一端锤成扁平状，并用砂纸磨光。

5. 电泳槽和电泳仪：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳仪器相同。

操作步骤：

1. 预染血清：将0.2ml血清与0.2ml苏丹黑染色液混合，置于37℃水浴中染色30分钟后进行离心（2000转/分钟，约5分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配制的0.45%琼脂糖凝胶加热直到融化，并用吸管将凝胶溶液注入载玻片，每片25ml，静置约半小时待其凝固。

3. 点加血清：在凝固后的琼脂糖凝胶板一端约2cm处，用切口刀片垂直切入凝胶后立即取出。然后用铜丝小匙取出长方形小条凝胶，使用滤纸吸干小槽中的水分，用血色素吸管吸取预染的血清约15μl，并注入小槽内。

4. 电泳：将含血清的凝胶板平行放置于电泳槽中，样品应在阴极一端。用巴比/妥缓冲液浸润两块三层纱布，将其轻轻紧贴在凝胶板两端，纱布另一端浸于电泳槽内的缓冲液中（注意：电极缓冲液不可用三羟甲基缓冲液替代）。接通电源，电压设置为120~130V，每片电流为3~4mA。约经电泳15至55分钟后可见分离的色带。

注意事项：

1. 电泳样品必须为新鲜的空腹血清。

2. 每一块凝胶可平行挖两个小槽，允许加两个样品。

3. 若使用与小槽形状、大小相同的有机玻璃片可在琼脂糖胶凝固前固定于适当位置，凝固后取出有机玻璃片，将在凝胶板上留下小槽，方便直接加样。

4. 若需保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）放入清水中浸泡脱盐2小时后，再置于80℃左右的烘箱中烘干即可。

结果及临床意义：

1. 正常人血清脂蛋白可分为三条区带，从负极到正极依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）和α-脂蛋白（比前β-脂蛋白略深），原点处应无乳糜微粒。

2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深，结合血清甘油三酯明显升高且胆固醇正常或略高，则可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 当β-脂蛋白区带比正常血清明显深染，结合血清总胆固醇显著增高且甘油三酯正常者为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高而甘油三酯略高的前β略溶者则为Ⅱb型高脂血症。

4. 如果β-和前β-两区带难以分离，并连在一起则称为“宽β区带”，结合血清甘油三酯和胆固醇均有所升高，可以定为Ⅲ型。

5. 如果在原点位置出现乳糜微粒，β和前β均正常或减低，且血清甘油三酯明显升高，则可诊断为Ⅰ型高脂蛋白血症。

人生就是博产品仅供科研实验使用，禁止用于临床用途！